กระบวนการที่มีประสิทธิภาพและต้นทุนต่ำสำหรับการชี้แจงและการกรองแบบอัลตราฟิลเตรชันของยีสต์ที่แสดงโปรตีนรีคอมบิแนนท์
การแสดงออกของยีนภายนอกของยีสต์ไม่เพียงแต่สามารถผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์และเปปไทด์ แอนติบอดีและวัคซีน ไซโตไคน์ ปัจจัยการเจริญเติบโต ฮอร์โมน และสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพอื่นๆ เท่านั้น แต่ยังสามารถนำมาใช้ในการผลิตเอนไซม์ทางอุตสาหกรรม อาหารเพื่อสุขภาพ และวัสดุชีวภาพ ซึ่งมีแนวโน้มการใช้งานในวงกว้าง .
ระบบการแสดงออกของยีสต์ประกอบด้วยระบบการแสดงออกที่ใช้กันทั่วไปสองระบบ นั่นคือ ระบบการแสดงออกของแซคคาโรไมเซส เชเรวิซิเอ และระบบการแสดงออกของยีสต์ที่มีเมทาโนโทรฟิค ระบบการแสดงออกของยีสต์เมทานอลเป็นระบบการแสดงออกของยีสต์ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายที่สุดในปัจจุบัน และ Pichia เป็นระบบที่ใช้กันมากที่สุดซึ่งสามารถใช้เมทานอลเป็นคาร์บอนและพลังงานได้ นอกจากนี้ยังมียีสต์ Hansen, Sphaeroides และอื่นๆ
ไม่ว่าระบบการแสดงออกของยีสต์จะเป็นแบบใด กระบวนการแยกและการทำให้บริสุทธิ์ในขั้นปลายน้ำจะคล้ายกัน และการไหลของกระบวนการเฉพาะจะใช้การแสดงออกของยีสต์ของโปรตีนรีคอมบิแนนท์และยาโพลีเปปไทด์เป็นตัวอย่าง
ตลับเมมเบรนกรองไมโครฟิลเตรชัน Guidling ใช้ช่องการไหลแบบเปิดและโหมดการกรองการไหลแบบสัมผัส ซึ่งสามารถประมวลผลของเหลวป้อนที่ซับซ้อน เช่น ของเหลวหมักยีสต์และของเหลวที่แตกตัวของเชื้อ E. coli ได้อย่างมีประสิทธิภาพ และสามารถรับประกันการขยายเชิงเส้นตั้งแต่การทดสอบขนาดเล็กไปจนถึงระดับการผลิต การออกแบบโมดูลาร์ขนาดกะทัดรัด การเชื่อมต่อท่อที่เรียบง่าย ความเป็นอิสระและความสามารถในการอ่านของระบบสามารถปกป้องผู้ปฏิบัติงานและป้องกันมลภาวะทางชีวภาพ และไม่มีการตรวจสอบการบำรุงรักษาและการทำความสะอาด ดังนั้นจึงเหมาะมากสำหรับขั้นตอนการชี้แจงของการประมวลผลขั้นต้นน้ำ
วัตถุประสงค์หลักของกระบวนการ UF/DF คือเพื่อขจัดสิ่งเจือปนและแทนที่บัฟเฟอร์ คาสเซ็ตเมมเบรนกรองอัลตราฟิลเตรชันแบบ Guidling มีขนาดรูพรุนของเมมเบรนเป็นเนื้อเดียวกันได้ดีและมีความสามารถในการชอบน้ำสูง ซึ่งสามารถให้ฟลักซ์ของเมมเบรนสูงขึ้นและการดูดซับโปรตีนต่ำลง และการออกแบบช่องการไหลที่เหมาะสมที่สุด โดยมีแรงดันตกคร่อมน้อยลง การถ่ายโอนวัสดุทำได้ง่าย และลดระยะเวลาการกรองลงอย่างมาก นอกจากนี้ ซีรีส์ผลิตภัณฑ์ยังครบถ้วนและยืดหยุ่นเพื่อตอบสนองความต้องการการใช้งานต่างๆ ในเครื่องชั่งที่แตกต่างกัน ดังนั้นจึงเหมาะมากสำหรับขั้นตอน UF/DF ของการประมวลผลดาวน์สตรีม
ต่อไปนี้เป็นกรณีการใช้งานของเมมเบรน Guidlingเทปคาสเซ็ทในการแสดงออกของยีสต์ของโปรตีนรีคอมบิแนนท์
ชี้แจงการกรองไมโครฟิลเตรชัน
เราใช้คาสเซ็ตเมมเบรนรูพรุนขนาด {{0}}.11 ตารางเมตร 0.22μm เพื่อชี้แจงของเหลวในการหมักยีสต์ 1.5 ลิตร (น้ำหนักโมเลกุลของโปรตีนเป้าหมาย 42-55 KD) โดยการกรองแบบไมโครฟิลเตรชัน ในกระบวนการไมโครฟิลเตรชันทั้งหมด มีการตรวจสอบอัตราการฟื้นตัวของโปรตีนเป้าหมาย การเปลี่ยนแปลงความขุ่น และการสูญเสียฟลักซ์ของเมมเบรน
0-17นาทีคือกระบวนการทำให้เข้มข้น 17-32นาทีคือกระบวนการล้างและการกรอง ในระหว่างกระบวนการกรองระดับไมโครทั้งหมด TMP ค่อยๆ เพิ่มขึ้น ความเร็วขาเข้าของของเหลวยังคงไม่เปลี่ยนแปลง และฟลักซ์ของวัสดุโดยเฉลี่ยอยู่ที่ 45LMH
ความขุ่นของของเหลวคือ 600NTU ก่อนการกรองระดับไมโครและ 8NTU หลังการกรองระดับไมโคร และความขุ่นเปลี่ยนไปอย่างเห็นได้ชัด
ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าผลผลิตของโปรตีนเป้าหมายคือ > 90% เทคโนโลยี Guidling ตลับเมมเบรน 0.22μm มีความเสถียรและเหมาะสำหรับสถานการณ์การใช้งานนี้
ความเข้มข้นของการกรองแบบอัลตราฟิลเตรชั่น
ความเข้มข้นของการกรองแบบอัลตราฟิลเตรชันของของเหลวที่ทำให้ใส 1.5 ลิตร (น้ำหนักโมเลกุลของโปรตีนเป้าหมาย 42-55kd) ถูกดำเนินการโดยใช้คาสเซ็ตเมมเบรน 10kd ขนาด 0.11 ตารางเมตร ในกระบวนการทั้งหมดของการกรองแบบอัลตราฟิลเตรชัน มีการตรวจสอบอัตราการฟื้นตัวของโปรตีนเป้าหมาย การสูญเสียฟลักซ์ของเมมเบรน และอัตราการฟื้นตัวของฟลักซ์ของน้ำ
ก่อนและหลังการใช้งาน อัตราการฟื้นตัวของเมมเบรนสามารถเข้าถึง 90%
0-15นาทีคือกระบวนการทำให้เข้มข้น 15-18นาทีคือกระบวนการแลกเปลี่ยนของเหลว ในระหว่างกระบวนการอัลตราฟิลเตรชันทั้งหมด TMP จะค่อยๆ เพิ่มขึ้น ความเร็วขาเข้าของของเหลวยังคงไม่เปลี่ยนแปลง และฟลักซ์ของวัสดุโดยเฉลี่ยอยู่ที่ 50LMH
ผลการวิจัยพบว่าโปรตีนเป้าหมายถูกดักจับไว้อย่างสมบูรณ์ Guidling Technology ตลับเมมเบรนขนาด 10kd สามารถทำงานได้อย่างเสถียรและเหมาะสำหรับสถานการณ์การใช้งานนี้
โปรตีนรีคอมบิแนนท์ส่วนใหญ่ที่แสดงออกโดยยีสต์นั้นไม่ได้แสดงออกมากนัก ความขุ่นของของเหลวที่กรองลดลงอย่างเห็นได้ชัดและอัตราการนำโปรตีนกลับคืนสูงขึ้น เนื่องจากเวลาโครมาโตกราฟีที่ตามมานั้นยาวเกินไป จะทำให้เกิดผลเสียต่อโปรตีน เพื่อลดเวลาการสุ่มตัวอย่างโครมาโตกราฟีให้สั้นลง สามารถเพิ่มความเข้มข้นของการกรองแบบอัลตราฟิลเตรชันหนึ่งขั้นตอนได้ และโปรตีนเป้าหมายสามารถเข้มข้นได้อย่างรวดเร็วหลังจากตัวอย่าง ซึ่งสามารถทำได้ บรรลุวัตถุประสงค์ในการประหยัดเวลา ลดปริมาณฟิลเลอร์ และลดต้นทุนการผลิต
โดยทั่วไปตลับเมมเบรนกรองไมโครฟิลเตรชันของ Guidling Technology สามารถลดความขุ่นของของเหลวป้อนให้เหลือน้อยกว่า 20NTU ได้ ซึ่งตอบสนองความต้องการของอัลตราฟิลเตรชั่นและโครมาโทกราฟีที่ตามมาได้อย่างเต็มที่ อัตราการกรองกลับคืนมาของตลับเมมเบรนแบบกรองอัลตราฟิลเตรชั่นจะแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับวัสดุที่แตกต่างกัน อัตราการฟื้นฟูโดยทั่วไปสามารถสูงถึง 90-95%
Guidling Technology ยินดีต้อนรับคุณในการขอชุดทดสอบสำหรับการประเมินที่เกี่ยวข้อง
เกี่ยวกับ กิดลิ่ง
Guidling Technology เป็นองค์กรเทคโนโลยีขั้นสูงระดับประเทศที่มุ่งเน้นด้านเภสัชภัณฑ์ชีวภาพ การเพาะเลี้ยงเซลล์ การทำให้บริสุทธิ์และความเข้มข้นของชีวเวชศาสตร์ การวินิจฉัยโรค และของเหลวทางอุตสาหกรรม เราประสบความสำเร็จในการพัฒนาอุปกรณ์กรองแบบแรงเหวี่ยง ตลับกรองแบบอัลตราฟิลเตรชันและไมโครฟิลเตรชัน ตัวกรองไวรัส ระบบ TFF ตัวกรองเชิงลึก เส้นใยกลวง ฯลฯ ซึ่งตอบสนองสถานการณ์การใช้งานของชีวเภสัชภัณฑ์ การเพาะเลี้ยงเซลล์ และอื่นๆ ได้อย่างสมบูรณ์ เมมเบรนและตัวกรองเมมเบรนของเรามีการใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านความเข้มข้น การสกัด และการแยกการกรองเบื้องต้น การกรองระดับไมโคร การกรองแบบอัลตราฟิลเตรชัน และนาโนฟิลเตรชัน กลุ่มผลิตภัณฑ์มากมายของเรา ตั้งแต่การกรองในห้องปฏิบัติการขนาดเล็กแบบใช้ครั้งเดียวไปจนถึงระบบการกรองการผลิต การทดสอบความปลอดเชื้อ การหมัก การเพาะเลี้ยงเซลล์ และอื่นๆ อีกมากมาย ตอบสนองความต้องการของการทดสอบและการผลิต Guidling Technology รอคอยที่จะร่วมมือกับคุณ!
