การชี้แจงเทคโนโลยีเมมเบรนและวัคซีน (Ⅰ)

วัคซีนมีมาจากแหล่งต่างๆ มากมาย เช่น สารสกัดจากเนื้อเยื่อ เซลล์แบคทีเรีย อนุภาคไวรัส โปรตีน และกรดนิวคลีอิกที่ผลิตโดยเซลล์รีคอมบิแนนท์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ยีสต์ และเซลล์แมลง

วิธีการผลิตวัคซีนที่พบมากที่สุดนั้นขึ้นอยู่กับกระบวนการหมักขั้นต้นตามด้วยการทำให้บริสุทธิ์ การผลิตวัคซีนเป็นกระบวนการที่ซับซ้อนซึ่งเกี่ยวข้องกับขั้นตอนและกระบวนการต่างๆ มากมาย การเลือกวิธีการทำให้บริสุทธิ์ที่ถูกต้องมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการบรรลุความบริสุทธิ์ของผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้ายตามที่ต้องการ การทำให้บริสุทธิ์วัคซีนเป็นขั้นตอนสำคัญที่มีผลกระทบอย่างมากต่อการกู้คืนผลิตภัณฑ์และการทำให้บริสุทธิ์ในขั้นตอนต่อไป สามารถใช้เทคนิคต่างๆ มากมายเพื่อทำให้บริสุทธิ์วัคซีนได้ การเลือกวิธีการเก็บตัวอย่างและอุปกรณ์ขึ้นอยู่กับประเภทของแบตเตอรี่ ลักษณะของผลิตภัณฑ์ที่เก็บตัวอย่าง และของเหลวในกระบวนการ เทคนิคเหล่านี้รวมถึงการกรองด้วยเมมเบรน (การกรองแบบไมโคร การกรองแบบไหลสัมผัส) การปั่นเหวี่ยง และการกรองแบบลึก (การกรองแบบไหลปกติ) จากประสบการณ์อันยาวนาน การทำให้บริสุทธิ์จากการเก็บเกี่ยววัคซีนมักจะทำได้โดยการปั่นเหวี่ยงตามด้วยการกรองแบบลึก

 

ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา เทคนิคที่ใช้เมมเบรนได้รับความนิยมในการปรับปรุงคุณภาพวัคซีน กระบวนการต้นน้ำใช้เทคโนโลยีแบบใช้แล้วทิ้งมากขึ้น ดังนั้นกลยุทธ์การเก็บเกี่ยวจึงต้องมีการเปลี่ยนแปลง บทความนี้ให้ภาพรวมที่ครอบคลุมเกี่ยวกับเทคโนโลยีที่ใช้เมมเบรนต่างๆ และการประยุกต์ใช้เทคโนโลยีเหล่านี้ในการปรับปรุงคุณภาพวัคซีน

 

01 บทนำ

วัคซีนเป็นส่วนประกอบสำคัญในการป้องกันโรคติดเชื้อซึ่งยังคงเป็นสาเหตุของการเสียชีวิตที่น่าตกใจ ประชากรราว 2 ถึง 3 ล้านคนได้รับการช่วยชีวิตจากโรคคอตีบ บาดทะยัก ไอกรน และหัดทุกปีด้วยการสร้างภูมิคุ้มกัน วัคซีนครอบคลุมตั้งแต่โปรตีนรีคอมบิแนนท์ขนาดเล็กไปจนถึงอนุภาคไวรัสทั้งหมดและแบคทีเรียทั้งหมด วัคซีนสามารถผลิตได้จากระบบต่างๆ เช่น ไข่ เซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม แบคทีเรีย เป็นต้น เนื่องจากความซับซ้อนและความหลากหลายของวัคซีน ปัจจุบันจึงไม่มีโปรโตคอลหรือเทมเพลตการทำให้บริสุทธิ์ที่เป็นกระแสหลัก แม้ว่าจะมีความสนใจในแพลตฟอร์มวัคซีนมากขึ้นก็ตาม

 

โดยทั่วไป กระบวนการวัคซีนสามารถแบ่งออกได้เป็น 3 ส่วน ได้แก่ ขั้นตอนการผลิต (การผลิตและการทำให้บริสุทธิ์) ขั้นตอนการบำบัดขั้นตอนปลายน้ำ (การทำให้บริสุทธิ์รวมถึงการกรองด้วยแสงอัลตรา โครมาโทกราฟี และการบำบัดด้วยสารเคมี) และการกำหนดสูตร (การดำเนินการเติมขั้นสุดท้าย) การทำให้บริสุทธิ์ (การกำจัดสารที่ไม่ต้องการในเบื้องต้น) มีบทบาทสำคัญในการกำหนดกระบวนการทำให้บริสุทธิ์ที่มีประสิทธิภาพ โดยไม่ขึ้นอยู่กับระบบการผลิต ขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ที่เหมาะสมจะกำจัดเซลล์ทั้งหมด เศษเซลล์ คอลลอยด์ และมวลรวมขนาดใหญ่ เพื่อลดภาระของกระบวนการปลายน้ำ ในบางกรณี การทำให้บริสุทธิ์ยังสามารถลดสิ่งเจือปนที่ไม่ละลายน้ำ โปรตีนของเซลล์โฮสต์ (HCP) และกรดนิวคลีอิกของเซลล์โฮสต์ได้ เช่นเดียวกับขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์อื่นๆ ขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์จำเป็นต้องได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อให้ได้ผลผลิตและความบริสุทธิ์สูงสุดในขณะที่ปรับให้เข้ากับความจำเพาะและข้อจำกัดในการผลิตวัคซีน

 

เนื่องจากวัคซีนชนิดต่างๆ มีความแตกต่างกัน จึงมีการใช้เทคนิคต่างๆ มากมายในการทำให้บริสุทธิ์ เช่น การปั่นเหวี่ยงหรือการกรอง (ตารางที่ 1)

 

โดยปกติแล้ว จำเป็นต้องทำชุดปฏิบัติการหลายชุดเพื่อให้ได้การชี้แจงตามต้องการ ปฏิบัติการแรกออกแบบมาเพื่อกำจัดอนุภาคขนาดใหญ่ (การชี้แจงเบื้องต้น) และปฏิบัติการที่สองออกแบบมาเพื่อกำจัดคอลลอยด์และอนุภาคขนาดเล็กกว่าไมครอนอื่นๆ (การชี้แจงขั้นที่สอง) การปั่นเหวี่ยงความเร็วต่ำเป็นตัวเลือกการชี้แจงเพียงครั้งเดียว ช่วยให้สามารถกำจัดเซลล์และเศษเซลล์ได้ด้วยการตกตะกอน การปั่นเหวี่ยงสามารถรองรับโหลดของแข็งจำนวนมาก และถูกใช้กันอย่างแพร่หลายในโหมดแบตช์หรือต่อเนื่องและเครื่องปั่นเหวี่ยงแบบจาน ต้องใช้เงินลงทุนและค่าบำรุงรักษาสูง และเผชิญกับความท้าทายในการขยายขนาดเนื่องจากไม่มีแบบจำลองการลดขนาดที่เชื่อถือได้ อย่างไรก็ตาม ผู้ผลิตวัคซีนเชิงพาณิชย์บางรายใช้เครื่องปั่นเหวี่ยงในการผลิตขนาดใหญ่ที่มีปริมาณการประมวลผลสูงและกิจกรรมการผลิตที่มากขึ้น

 

การกรองเพื่อชี้แจงสามารถทำได้โดยการกรองแบบไหลปกติ (NFF หรือเรียกอีกอย่างว่าการกรองแบบปลายตัน) หรือการกรองแบบไหลสัมผัส (TFF หรือเรียกอีกอย่างว่าการกรองแบบไหลขวาง) นอกจากนี้ยังมีโหมดการกรองเฉพาะ (การกรองแบบลึก) ที่มีวัสดุที่มีประจุบวกและตัวกรองแบบ AIDS ที่ช่วยเพิ่มการกักเก็บเศษเซลล์ คอลลอยด์ และส่วนประกอบที่ไม่ต้องการที่มีประจุลบ

 

ตัวกรองเมมเบรนจะกักเก็บอนุภาคโดยการแยกขนาดและไม่มีความสามารถในการกักเก็บสิ่งสกปรกสูง จึงเหมาะสำหรับขั้นตอนการชี้แจงขั้นที่สอง ทั้งตัวกรองแบบลึกและตัวกรองเมมเบรนนั้นปรับขนาดและนำไปใช้ได้ง่าย (การออกแบบระบบที่เรียบง่าย) ต่างจาก NFF ตัวกรอง TFF จะใช้สำหรับการชี้แจงขั้นแรก (การกรองแบบไมโครฟิลเตรชัน) เมมเบรนที่มีช่วงตัดขาดที่ 0.1-0.65 μm (ควรใช้แบบที่มีช่องเปิด) ถูกนำมาใช้เพื่อกักเก็บเซลล์ เศษเซลล์ และสารปนเปื้อนขนาดใหญ่ชนิดอื่นๆ ได้สำเร็จ อุปกรณ์ TFF ส่วนใหญ่สามารถปรับขนาดเชิงเส้นและนำกลับมาใช้ใหม่ได้หลังจากทำความสะอาด ซึ่งช่วยลดต้นทุนของวัสดุสิ้นเปลืองในขั้นตอนนี้ได้อย่างมาก

 

ขั้นตอนการชี้แจงจะอยู่ระหว่างกระบวนการต้นน้ำและปลายน้ำ และบางครั้งมักถูกมองข้ามระหว่างการพัฒนากระบวนการวัคซีน เนื่องจากต้องให้ความสำคัญกับเวลาและทรัพยากรสำหรับขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์อื่นๆ เช่น การใช้โครมาโทกราฟีหรือการปั่นเหวี่ยงแบบไล่ระดับความหนาแน่น

 

แม้แต่สิทธิบัตรสำหรับกระบวนการผลิตวัคซีนก็มักจะละเว้นขั้นตอนการชี้แจง ประสิทธิภาพในการชี้แจงส่งผลโดยตรงต่อประสิทธิภาพของกระบวนการปลายน้ำ ขั้นตอนชี้แจงที่ปรับให้เหมาะสมไม่ดีอาจส่งผลเสียต่อความจุของตัวกรองที่ผ่านการฆ่าเชื้อหรืออาจทำให้เรซินโครมาโตกราฟีมีอายุการใช้งานสั้นลง ปัจจุบัน ความคาดหวังด้านกฎระเบียบที่เข้มงวดยิ่งขึ้นมักทำให้ผู้ผลิตวัคซีนผลิตวัคซีนที่มีความบริสุทธิ์มากขึ้น มีลักษณะเฉพาะชัดเจนแต่ราคาไม่แพง ในกรณีนี้ ทุกขั้นตอนต้องได้รับความสนใจอย่างเหมาะสม แนวโน้มปัจจุบันชี้ให้เห็นว่ากระบวนการต้นน้ำกำลังมุ่งหน้าสู่ระบบการแสดงออกที่ "สะอาดกว่า" (เช่น เซลล์ที่เพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ไม่มีซีรั่มจะเข้ามาแทนที่ไข่) โดยให้ผลผลิตเพิ่มขึ้นและมีความหนาแน่นของเซลล์สูงขึ้น

 

กระบวนการฟอกปลายน้ำกำลังถูกทำให้เรียบง่ายขึ้นและคล่องตัวขึ้นเพื่อเพิ่มความบริสุทธิ์ของผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้าย เพื่อจัดการกับการเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ ขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ไม่สามารถกลายเป็นคอขวดได้ ในกรณีนี้ เทคโนโลยีการกรองจะรับมือกับความท้าทายใหม่ในการทำให้บริสุทธิ์ โดยแก้ไขปัญหาของความยืดหยุ่นของกระบวนการที่เพิ่มขึ้น ความเป็นไปได้ของการใช้ครั้งเดียว และต้นทุนการลงทุนที่ลดลง

 

02 การชี้แจงวัคซีนป้องกันไวรัส

มีการใช้เทคนิคชี้แจงหลายประเภท ไม่ว่าจะใช้เพียงอย่างเดียวหรือร่วมกันก็ตาม เพื่อชี้แจงผลการเก็บเกี่ยวที่ปลายอาหารของวัคซีนได้สำเร็จ

ขนาดนำร่อง: 1-20L, ขนาดการผลิต: มากกว่า 20L

 

2.1 ข้อควรระวังในการขอคำชี้แจงวัคซีนไวรัส

วัคซีนหลายชนิดมีอนุภาคไวรัสทั้งหมดหรือบางส่วนเพื่อสร้างภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อไวรัส โดยทั่วไปวัคซีนจะแบ่งเป็น 4 ประเภทกว้างๆ ดังนี้

วัคซีนเชื้อเป็น (LAV) ซึ่งใช้ไวรัสสายพันธุ์ที่อ่อนฤทธิ์ลงเพื่อลดความรุนแรง ไวรัสที่ถูกทำให้อ่อนฤทธิ์สามารถแพร่พันธุ์ในร่างกายได้แต่ไม่ก่อโรค

วัคซีนไวรัสที่ไม่ทำงาน (IV) ซึ่งมีไวรัสที่ทำให้ไม่ทำงานด้วยสารเคมีหรือแสงอัลตราไวโอเลตเพื่อกำจัดการติดเชื้อ อนุภาคไวรัสสามารถเป็นแบบสมบูรณ์ แบ่ง หรือบริสุทธิ์ได้ (เฉพาะโปรตีนแอนติเจนเท่านั้น)

วัคซีนไวรัสเวกเตอร์ (VV) เป็นไวรัสที่ไม่ก่อโรคและยังมีแอนติเจนของไวรัสก่อโรคอยู่ โครงสร้างที่พัฒนาขึ้นใหม่นี้ยังใช้สำหรับการบำบัดด้วยยีนอีกด้วย

วัคซีนอนุภาคคล้ายไวรัส (VLP) เป็นวัคซีนกลุ่มย่อยของไวรัสชนิดหนึ่งที่เลียนแบบโครงสร้างโดยรวมของอนุภาคไวรัสแต่ไม่มีสารพันธุกรรมที่ทำให้เกิดการติดเชื้อ

 

ในกรณีส่วนใหญ่ อนุภาคไวรัสจะคงสภาพสมบูรณ์อย่างสมบูรณ์ในขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ แม้แต่ในระหว่างการสลายวัคซีนไวรัส (โดยทั่วไป การแยกส่วนจะดำเนินการในขั้นตอนปลายน้ำ ในสภาพแวดล้อมที่บริสุทธิ์กว่า)

ความท้าทายหลักของการทำให้ไวรัสบริสุทธิ์คือการนำอนุภาคไวรัสที่มีผลผลิตสูงกลับคืนมาในขณะที่กำจัดเศษเซลล์ ก้อนเนื้อขนาดใหญ่ และสารปนเปื้อนที่ไม่ละลายน้ำได้อย่างมีประสิทธิภาพ ตามที่อธิบายไว้ในหัวข้อต่อไปนี้ มีหลายปัจจัยที่อาจทำให้ไวรัสเสื่อมหรือสูญหาย นอกจากนี้ ผลผลิตไวรัสอาจพึ่งพาได้ยากเนื่องจากความแปรปรวนสูงของวิธีทดสอบเชิงปริมาณของไวรัสในขั้นตอนนี้ของกระบวนการ โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับวัคซีน LAV และ VV สำหรับวัคซีนเหล่านี้ ผลผลิตไวรัสมักจะได้รับการประเมินโดยใช้การทดสอบการติดเชื้อ เช่น การทดสอบคราบจุลินทรีย์หรือการทดสอบ TCID 50 ความจริงที่ว่าสารประกอบที่เก็บเกี่ยวได้บางส่วนอาจรบกวนความสามารถของไวรัสในการติดเชื้อเซลล์ที่ระบุ ทำให้ความแปรปรวนของวิธีการเชิงปริมาณนี้เพิ่มมากขึ้น

 

2.2 กลยุทธ์การชี้แจงวัคซีนไวรัส

วัคซีนไวรัสมีความแตกต่างกันมากในด้านขนาด โครงสร้าง รูปร่าง และระบบการแสดงออก (ตารางที่ 3)

ดังนั้นโดยทั่วไปแล้วจะไม่มีเทมเพลตสำหรับกระบวนการปลายน้ำ โดยเฉพาะขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ ในทางทฤษฎี สามารถเลือกเทคนิคที่มีอยู่ทั้งหมด (การปั่นเหวี่ยงความเร็วต่ำ การกรองด้วยไมโครฟิลเตรชัน TFF และ NFF) และอาจรวมเข้าด้วยกันเพื่อทำให้ไวรัสบริสุทธิ์ได้ ในความเป็นจริง ความสำเร็จของวิธีการทำให้บริสุทธิ์นั้นได้รับอิทธิพลจากระบบการแสดงออกและคุณสมบัติทางฟิสิกเคมีของไวรัสที่เกี่ยวข้อง

 

Recently, the high cell density process of viral vaccines is being explored. High cell density processes add to the challenge of clarification. Many treatment methods are by preconditioning, i.e. polymer-induced flocculation, precipitation, alternating TFF, etc. For example, Tomic et al. describe a method for high cell density collection (>วิธีการทำให้บริสุทธิ์ด้วยปริมาณเซลล์ {{0}} เซลล์ต่อมิลลิลิตร โดยใช้โพลิเมอร์ที่มีประจุบวก ทำให้พื้นที่การกรองลึกลดลง 4 เท่าเมื่อเทียบกับวิธีการดั้งเดิม เทคนิคนี้ช่วยให้สามารถเก็บเกี่ยวเครื่องหมักที่มีความจุขนาดใหญ่ได้โดยไม่ต้องใช้เครื่องเหวี่ยง ในทำนองเดียวกัน Riske และคณะได้แสดงให้เห็นว่าการบำบัดด้วยไคโตซานกับเซลล์เพาะเลี้ยงขนาด 40 ลิตร (0.02%) ที่มีของแข็ง 1.4-2.6% ทำให้ความสามารถในการกรองสัมบูรณ์เพิ่มขึ้น 7- เท่าหลังจากการกรองลึก

 

นอกจากนี้ พวกเขายังกล่าวถึงว่าไคโตซานดูเหมือนจะช่วยปรับปรุงประสิทธิภาพในการทำให้บริสุทธิ์โดยการจับตัวเป็นก้อนของอนุภาคขนาดเล็กที่มักจะตกตะกอนในเครื่องเหวี่ยง วิธีการเตรียมการล่วงหน้าและการจับตัวเป็นก้อนมีแนวโน้มที่จะยังคงเป็นส่วนหนึ่งของการกรองวัคซีนในอนาคต สารแทรกซึม ได้แก่ น้ำตาล ไกลคอล และกรดอะมิโน จะทำให้ไวรัสจับตัวเป็นก้อนโดยเฉพาะ การตกตะกอนไวรัสด้วยสารละลายออสโมซิสตามด้วยการกรองด้วยไมโครฟิลเตรชันขนาด 0.2µ สามารถใช้เป็นกระบวนการที่ครอบคลุมสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ไวรัส สารแทรกซึมสามารถกระตุ้นการรวมตัวของไวรัสได้โดยการลดชั้นไฮเดรชั่นรอบๆ อนุภาคเพื่อจับตัวเป็นก้อนของอนุภาคไวรัสที่ไม่มีแคปซูลและอนุภาคไวรัสที่มีแคปซูลที่ไม่ชอบน้ำ แม้ว่าสารแทรกซึมจะแสดงให้เห็นว่าจับตัวเป็นก้อนของไวรัสได้ แต่แนวทางนี้มีศักยภาพที่จะเป็นแพลตฟอร์มสำหรับการทำให้บริสุทธิ์วัคซีนในอนาคต และยังไม่มีการพิสูจน์ความเป็นไปได้ในการทำให้บริสุทธิ์วัคซีนนำร่องหรือขนาดใหญ่ วิธีการเตรียมการก่อนการตกตะกอน ซึ่งมีแนวโน้มว่าจะยังคงเป็นส่วนหนึ่งของการกรองวัคซีนในอนาคต ดำเนินการในถังหมักขนาด 2 ลิตร เพื่อให้สามารถใช้ในกระบวนการผลิตขนาดใหญ่ได้ วิธีการเหล่านี้จำเป็นต้องได้รับการตรวจสอบความถูกต้องในระดับนำร่องและการผลิต

 

2.2.1 การแสดงผลกระทบของระบบ

วิธีการชี้แจงส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับประเภทของกระบวนการต้นน้ำและระบบการแสดงออก ซึ่งจะกำหนดประเภทและระดับของสารปนเปื้อนที่ต้องกำจัด วัคซีนไวรัสโดยทั่วไปผลิตในตัวอ่อนไก่โดยสายเซลล์ต่อเนื่องของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหรือสัตว์ปีกหรือเซลล์แบคูโลไวรัส/แมลง ซึ่งเป็นระบบการแสดงออกที่ซับซ้อนกว่า VLP บางประเภทอาจผลิตขึ้นโดยระบบการแสดงออกต่างสายพันธุ์อื่นๆ (แบคทีเรีย ยีสต์ เซลล์พืช)

 

2.2.1.1 ไวรัสที่เกิดขึ้นในตัวอ่อนไก่

วัคซีนถูกผลิตขึ้นในไข่มานานหลายทศวรรษ งานวิจัยนี้ย้อนกลับไปถึงปี 1931 เมื่อ Woodruff และ Good Pasture ประสบความสำเร็จในการใช้เยื่อคลอริโอ-อัลลันโทอิกของไข่ที่มีความสมบูรณ์เป็นสารตั้งต้นสำหรับการเติบโตของไวรัส ปัจจุบัน วัคซีนสำหรับมนุษย์และสัตวแพทย์จำนวนมากยังคงผลิตขึ้นโดยใช้กระบวนการโบราณนี้ วัคซีนที่รู้จักกันดีที่สุดน่าจะเป็นวัคซีนป้องกันไข้หวัดใหญ่ตามฤดูกาล หลักการคือการฉีดไวรัสที่ต้องการเข้าไปในไข่ไก่แล้วจึงขยายพันธุ์ในเยื่อคลอริโอ-อัลลันโทอิก หลังจากการสืบพันธุ์ จะรวบรวมของเหลวอัลลันโทอิกที่มีอนุภาคไวรัสจำนวนมากและทำการทำให้บริสุทธิ์

 

ของเหลวอัลลันโทอิกเป็นอาหารที่ทำให้บริสุทธิ์ได้ยาก เนื่องจากมีปริมาณแร่ธาตุและโปรตีนสูง (รวมถึงโอวัลบูมิน) ทำให้มีความหนืดสูง ของเหลวอัลลันโทอิกยังมีสารประกอบเนื้อเยื่อที่จำเป็นจากตัวอ่อนไก่ เช่น ขน ปาก หลอดเลือด หรือเซลล์เม็ดเลือด เนื่องจากมีปริมาณของแข็งสูง การปั่นเหวี่ยงความเร็วต่ำจึงเป็นตัวเลือกที่ต้องการสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ขั้นต้น ซึ่งโดยปกติแล้วจะส่งผลให้มีอัตราการฟื้นตัวประมาณ 70% อย่างไรก็ตาม การทำให้บริสุทธิ์ขั้นต้นโดยใช้เทคนิคการกรองก็เป็นไปได้เช่นกัน สำหรับ NFF ตัวกรองลึกที่ทำจากโพลีโพรพีลีนและเซลลูโลสมีความสามารถในการรวบรวมของเหลวอัลลันโทอิกได้ดี ตัวกรองพื้นผิวที่ทำจากโพลีโพรพีลีนหรือตัวกรองลึกที่ทำจากเซลลูโลสสามารถมีความจุได้ 150-210 ลิตร/ตร.ม. และลดความขุ่นของการไหลของอาหารได้มากถึง 3 เท่า อุปกรณ์ TFF แบบช่องป้อนแบบเปิดยังเหมาะสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ของเหลวอัลลันโทอิก เนื่องจากอุปกรณ์นี้เหมาะสำหรับการสูญเสียแรงดันขั้นต่ำผ่านช่องป้อน จึงช่วยลดการอุดตันของช่องป้อนได้

 

ขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ขั้นที่สองสามารถทำได้ง่าย ๆ ด้วย NFF โดยทั่วไปแล้ว การผสมผสานระหว่างวัสดุโพลีโพรพีลีน เซลลูโลส และไฟเบอร์กลาสจะแสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพที่ดี และทางเลือกอื่นสำหรับขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ขั้นที่สองคือการใช้ TFF และอุปกรณ์เมมเบรนไมโครฟิลเตรชั่นขนาด {{0}}.65μm หรือ 0.45μm และควบคุมการไหลของออสโมซิส อุปกรณ์ TFF ช่องเปิดที่มี PVDF ที่ชอบน้ำหรือเมมเบรน PES ที่ชอบน้ำสามารถใช้ในขั้นตอนนี้ได้

สิ่งสำคัญที่ต้องทราบคืออนุภาคไวรัสอาจเกี่ยวข้องกับเศษวัสดุที่ไม่ละลายน้ำ ซึ่งอาจลดการผลิตไวรัสได้อย่างมากในระหว่างการทำให้บริสุทธิ์ การใช้สารละลายเกลือสามารถลดการเชื่อมโยงระหว่างไวรัสไข้หวัดใหญ่และชิ้นส่วนแข็งได้ ส่งผลให้การผลิตเพิ่มขึ้นประมาณสองเท่าโดยไม่ส่งผลกระทบต่อความสมบูรณ์ของอนุภาคไวรัส

 

2.2.1.2 ไวรัสที่ผลิตในเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมและนกตามลำดับ

เมื่อไม่นานมานี้ วัคซีนไวรัสบางชนิดได้เลิกใช้กระบวนการที่ใช้ไข่แล้วหันมาใช้กระบวนการที่ใช้เซลล์เพาะเลี้ยงแทน (โดยเฉพาะวัคซีนป้องกันไข้หวัดใหญ่) เหตุผลหลักของการเปลี่ยนแปลงนี้คือเพื่อป้องกันปัญหาการผลิตวัคซีนที่เกี่ยวข้องกับไข่ตัวอ่อน (เช่น การขาดแคลนไข่ที่อาจเกิดขึ้นในกรณีที่เกิดการระบาดของโรคสัตว์ปีก) ด้วยเหตุนี้ วัคซีนและเวกเตอร์ไวรัสหลายประเภทจึงได้รับการพัฒนาโดยใช้เซลล์สายพันธุ์ต่อเนื่องจากสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหรือสัตว์ปีก เซลล์สายพันธุ์ทั่วไป (เช่น เซลล์สายพันธุ์ Vero, MDCK หรือ HEK293) หรือเซลล์สายพันธุ์ที่เป็นกรรมสิทธิ์

 

ขึ้นอยู่กับระบบการแสดงออก ไวรัสอาจอยู่ในเซลล์ ซึ่งต้องมีขั้นตอนไลซิสเซลล์ หรืออาจอยู่ภายนอกเซลล์ (ไลซิสหรือการแตกหน่อ) ปริมาณของแข็งและเนื้อหาที่ละลายน้ำได้ที่ได้จากการเพาะเลี้ยงเซลล์นั้นสะอาดกว่าเฟสของเหลวอัลลันโทอิกมาก ดังนั้น เทคโนโลยี NFF จึงนำไปใช้ได้ง่ายกว่าและมีความจุที่สูงกว่าอย่างมาก อย่างไรก็ตาม ความจุในการกรองนั้นขึ้นอยู่กับเงื่อนไขการเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นอย่างมาก เช่น ความหนาแน่นของเซลล์หรือความสามารถในการมีชีวิตของเซลล์เมื่อเก็บเกี่ยว พารามิเตอร์เหล่านี้ส่งผลต่อปริมาณของเศษเซลล์และแมโครแอ็กเกรเกตที่สามารถอุดตันตัวกรองและเมมเบรนลึก ส่งผลให้ความจุลดลง

 

Thomassen และคณะเป็นตัวอย่างที่ดีของการชี้แจง NFF ใช้ในกระบวนการผลิตไวรัสโปลิโอที่ไม่ทำงาน (IPV) เซลล์ Vero ที่เพาะเลี้ยงบนไมโครแคริเออร์ถูกนำมาใช้เพื่อขยายพันธุ์ไวรัสโดยมีความหนาแน่นของเซลล์ {{0}}.78 x 106 เซลล์ / มล. TOI ใช้ตะแกรงสเตนเลสสตีลขนาด 75 ไมโครเมตรสำหรับการชี้แจงเบื้องต้นเพื่อกำจัดไมโครแคริเออร์ออกจากการเก็บเกี่ยว การคัดเกรดแบบสองชั้นได้รับการชี้แจงโดยใช้ตัวกรองความหนาแน่นลึก (0.2-2.0 ไมโครเมตร) ตามด้วยตัวกรองเกรดที่ผ่านการฆ่าเชื้อ

หน่วยใช้แล้วทิ้งแบบปรับขนาดได้ที่เลือกไว้ได้รับการนำไปใช้สำเร็จในการเตรียมวัสดุทดลองทางคลินิก Sabin IPV ในระดับ 350 L โดยขึ้นอยู่กับซีโรไทป์ของไวรัส อัตราการฟื้นตัวของไวรัสจะได้ 86 ถึง 96 เปอร์เซ็นต์

 

2.2.1.3 แบคคูโลไวรัส/อนุภาคคล้ายไวรัสที่ผลิตในระบบเซลล์แมลง

การพิจารณาใช้ระบบเซลล์แบคทีเรียบาคูโลไวรัส/แมลงในการผลิตวัคซีนในปริมาณมากนั้นค่อนข้างใหม่ แต่กำลังดึงดูดความสนใจเพิ่มขึ้นในสาขาของเวกเตอร์ไวรัสและ VLP ประโยชน์หลักของระบบนี้คือใช้เวลาสั้น (ไม่จำเป็นต้องสร้างสายเซลล์) และปลอดภัย (ไม่มี DNA ของไวรัสที่สมบูรณ์) นอกจากนี้ยังมีข้อเสียบางประการ เช่น ความจำเป็นในการกำจัดแบคทีเรียบาคูโลไวรัสและการทำให้ผลิตภัณฑ์มีเสถียรภาพ

 

Cervarix ซึ่งเป็นวัคซีน VLP สำหรับป้องกันการติดเชื้อ Human papillomavirus ที่ผลิตโดย GlaxoSmithKline เป็นวัคซีนสำหรับมนุษย์ชนิดแรกที่ผลิตในเชิงพาณิชย์ในเซลล์แมลง ปัจจุบันวัคซีนหลายชนิดที่ใช้ VLP และเวกเตอร์ rAAV ซึ่งผลิตในเซลล์แมลงที่ติดเชื้อไวรัสแบคูโลไวรัสกำลังอยู่ในระหว่างการพัฒนา เซลล์แมลงที่มาจากหนอนกระทู้ Spodoptera frugiperda (Sf9 และ Sf21) และหนอนกระทู้ Trichoplusia ni (เซลล์ BTI-TN5B1-4) เป็นที่นิยมใช้มากที่สุดเนื่องจากสามารถเจริญเติบโตในสารแขวนลอยได้ ซึ่งทำให้กระบวนการต้นน้ำง่ายขึ้น หลังจากเจริญเติบโตจนมีความหนาแน่นตามต้องการของเซลล์ที่มีชีวิตแล้ว เซลล์เหล่านี้จะได้รับเชื้อแบคูโลไวรัสรีคอมบิแนนท์ในระยะการเจริญเติบโตของเซลล์แบบเอ็กซ์โพเนนเชียลเพื่อแสดงออกถึงโปรตีน จีโนมขนาดใหญ่ของแบคูโลไวรัสทำให้สามารถแสดงออกถึงโปรตีนที่แตกต่างกันได้ 5 ชนิดขึ้นไป ซึ่งตรงกับความซับซ้อนของ VLP และเวกเตอร์ไวรัส

 

Bernard et al. ได้อธิบายกระบวนการต่อเนื่องของการเพาะเลี้ยงเซลล์แมลง กระบวนการนี้มีความแปรปรวนสูง ซึ่งสะท้อนถึงความหลากหลายของโปรตีนที่ผลิตขึ้นโดยใช้เทคนิคนี้ ขั้นตอนแรกของลำดับการทำให้บริสุทธิ์นั้นได้รับอิทธิพลอย่างมากจากลักษณะปริมาตรของไบโอรีแอคเตอร์ (เช่น ความหนาแน่นของเซลล์และความสามารถในการมีชีวิต) หรือจากลักษณะของผลิตภัณฑ์ที่ปล่อยออกมา (หลั่งออกมาโดยการแตกหน่อหรือการสลายเซลล์) การติดเชื้อแบคทีเรียแบคคูโลไวรัสของเซลล์แมลงสามารถทำให้เซลล์สลายได้ภายใน 3-5 วัน การทำลายเซลล์อาจนำไปสู่การเพิ่มขึ้นของกิจกรรมการย่อยสลายโปรตีนและปัจจัยด้านสิ่งแวดล้อมอื่นๆ ที่อาจนำไปสู่การย่อยสลายของโปรตีนรีคอมบิแนนท์

มีการพยายามพัฒนาแบคูโลไวรัสที่มีความสามารถในการเริ่มต้นการแตกสลายของเซลล์ได้ต่ำกว่า แบคูโลไวรัสสามารถทำลายแมลงที่ติดเชื้อได้น้อยกว่า 10 เปอร์เซ็นต์

 

การสลายเซลล์สามารถทำได้โดยใช้หลากหลายวิธี เช่น การแช่แข็งและละลาย การใช้ผงซักฟอก การทำให้เซลล์เป็นเนื้อเดียวกัน หรือการบำบัดด้วยคลื่นเสียงความถี่สูง เซลล์แมลงไม่มีผนังเซลล์ จึงละลายได้เร็ว แม้ว่าจะมีรายงานการบำบัดด้วยคลื่นเสียงความถี่สูงในกระบวนการทดสอบหลายกระบวนการ แต่ไม่ค่อยมีการใช้ในระดับทดลองหรือเชิงพาณิชย์ วิธีที่พบมากที่สุดคือการใช้การทำให้เซลล์เป็นเนื้อเดียวกันเพื่อทำลายเซลล์ในสภาวะที่มีผงซักฟอกที่มีความเข้มข้นต่ำ (0.1% Triton X-100 หรือ NP-40) การใช้ผงซักฟอกและการทำให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยไมโครฟลูอิไดเซชันหรือการทำให้เซลล์เป็นเนื้อเดียวกันด้วยแรงกระแทกออสโมซิสได้รับการนำไปใช้ในกระบวนการผลิตขนาดใหญ่หลายกระบวนการอย่างประสบความสำเร็จ โดยทั่วไป เซลล์แมลงจะถูกแขวนลอยในบัฟเฟอร์ไลซิส (50 mM TRIS pH7.7, 300 mM NaCl, กลีเซอรอล 5%, PMSF 0.2 mM และสารยับยั้งโปรตีเอส) ในระหว่างนั้น จะมีการเติม Triton-X100 ลงในความเข้มข้นสุดท้าย 0.1% ตามด้วยอัลตราซาวนด์อ่อนๆ หรือไมโครฟลูอิไดเซชัน จากนั้นจึงปั่นส่วนผสมเพื่อกำจัดอนุภาคที่ไม่ละลายน้ำ

 

ในระยะนี้ ไลเสทอาจมีลักษณะขุ่นมากและกรองได้ยากโดยใช้ตัวกรองขนาด 0.45μm บางครั้งอาจพบการสูญเสียมากถึง 30% ในระหว่างขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ด้วยไพโรไลซิส การเติมเบนโซเอ็นไซม์ในระยะการแยกส่วนจะช่วยแก้ปัญหาการกรองได้ การทำความสะอาดเซลล์ด้วยน้ำเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟตหลังการเก็บเกี่ยวและการ "แช่แข็ง-ละลาย" อย่างรวดเร็วในเกลือสูง (NaCl 500mM) ที่มีบัฟเฟอร์สำหรับการแยกส่วนจะช่วยขจัดมวลรวม

 

การทำให้บริสุทธิ์ของ VLP และเวกเตอร์ไวรัสที่ผลิตโดยเซลล์แมลงเกิดขึ้นหลังจากการแตกสลายของเซลล์ (โดยการบำบัดทางเคมีหรือทางกล) ซึ่งไม่เพียงแต่จะปลดปล่อยอนุภาคไวรัสเท่านั้น แต่ยังปลดปล่อยกรดนิวคลีอิกของเซลล์จำนวนมากอีกด้วย เซลล์แมลงสามารถเติบโตได้ที่ความหนาแน่นของเซลล์สูง ตั้งแต่ 1-9.10 6 เซลล์/มล. ดังนั้น ขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ควรเกี่ยวข้องกับความหนาแน่นของเซลล์สูง ปริมาณกรดนิวคลีอิกสูง และหากเป็นไปได้ ควรกำจัดอนุภาคของแบคูโลไวรัส เพื่อให้เรื่องซับซ้อนขึ้น VLP หรือเวกเตอร์ไวรัสและแบคูโลไวรัสอาจมีขนาดใกล้เคียงกัน (แบคูโลไวรัสมีความกว้าง 60-80 นาโนเมตรและยาว 300-400 นาโนเมตร) เนื่องด้วยความหนาแน่นของเซลล์สูง การปั่นเหวี่ยงจึงเป็นเทคนิคที่ต้องการสำหรับการทำให้บริสุทธิ์เบื้องต้นมานานหลายทศวรรษ อย่างไรก็ตาม กระบวนการเมมเบรนดูเหมือนจะเป็นทางเลือกที่น่าสนใจมาก เนื่องจากสามารถกำหนดความสามารถในการปรับขนาดได้ง่าย

 

ตัวกรองแบบลึกถูกนำมาใช้ในกระบวนการปลายน้ำของอนุภาคคล้ายโรต้าไวรัสสามชั้นได้อย่างมีประสิทธิภาพ ในระดับห้องปฏิบัติการ มักใช้วิธีการอัลตราเซนตริฟิวจ์แบบไล่ระดับความหนาแน่น CsCl เพื่อแยกอนุภาคที่ซับซ้อนเหล่านี้ นักวิจัยประเมินไม่เพียงแต่ขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ของตัวกรองแบบลึกเท่านั้น แต่ยังรวมถึงกระบวนการปลายน้ำทั้งหมดด้วย (การแยก Triton X-100 และการกรองแบบลึก ตามด้วยอัลตราฟิลเตรชันและการแยกขนาดอนุภาค) ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าผลผลิตของการไล่ระดับความหนาแน่น CsCl สามารถไปถึง 37%

วิธีการเหวี่ยงแรงสูงนั้นอยู่ที่ประมาณ 10% อีกตัวอย่างหนึ่งคือ เส้นใยกลวงขนาด 0.45 ไมโครเมตรและเส้นใยละเอียดขนาดเส้นผ่านศูนย์กลาง 500 kDa ถูกนำมาใช้เพื่อกู้คืนและทำให้อนุภาคคล้าย HIV ที่เกิดขึ้นในเซลล์แมลงมีความเข้มข้นมากขึ้น ในการศึกษานี้ แรงเฉือนของเส้นใยกลวงได้รับการปรับให้เหมาะสมโดยพิจารณาจากความสมบูรณ์ของเซลล์ ผลลัพธ์ ได้มีการสร้างกระบวนการแรงเฉือนต่ำเพื่อแทนที่การเหวี่ยงแรงสูงแบบไล่ระดับน้ำตาลในตาราง

 

กระบวนการนี้มีศักยภาพในการนำไปประยุกต์ใช้ในการผลิตจำนวนมาก ฟิลเตอร์แบบลึกยังถูกนำมาใช้ในการผลิตไวรัสที่เกี่ยวข้องกับอะดีโนรีคอมบิแนนท์ได้สำเร็จอีกด้วย การสลายเซลล์ดำเนินการโดยใช้เครื่องรบกวนเซลล์เชิงกลแบบลูกสูบสองตัว ตามด้วยการบำบัดด้วยนิวคลีเอส ในขั้นตอนการชี้แจง มีการใช้ฟิลเตอร์แบบลึกที่ทำจากไฟเบอร์กลาสขนาด 1.2 ไมโครเมตร ตามด้วย PES แบบชอบน้ำขนาด 0.8 ไมโครเมตร และ PES แบบชอบน้ำขนาด 0.2 ไมโครเมตร ฟิลเตอร์ที่มีขนาดตามสัดส่วนจะใช้สำหรับชุดกระบวนการตั้งแต่ขนาดเล็กไปจนถึงขนาด 200 ลิตร ฟิลเตอร์แบบลึกถูกนำมาใช้อย่างประสบความสำเร็จ และค่า TFF ที่มีฟิล์มแบนหรือเส้นใยกลวงขนาด 0.2 ไมโครเมตรหรือ 0.45 ไมโครเมตรยังได้รับการรายงานว่ามีประสิทธิภาพมากอีกด้วย

 

การศึกษาโดย Tecnologica (IBET) ที่สถาบันชีววิทยาการทดลอง Oeiras ในประเทศโปรตุเกสใช้ NFF เพื่อทำการชี้แจง VLP ของไวรัสตับอักเสบซีที่แสดงออกโดยแบคูโลไวรัสโดยไม่ต้องปั่นเหวี่ยง ตัวกรองโพลีโพรพีลีนที่มีอัตราปกติ (10, 5,0.6 และ 0.3μm) ใช้เพื่อชี้แจงการเก็บเกี่ยว VLP ตัวกรองเดียวกันที่มีอัตรารูพรุน 0.6μm และ 0.3μm จะใช้สำหรับการกรองในศูนย์เก็บเกี่ยว VLP ตัวกรองทั้งหมดที่ศึกษาได้รับการทดสอบอัตราการฟื้นตัวของ HCV-VLP และเปรียบเทียบวิธีการกรองที่แนะนำ ผลลัพธ์แสดงอยู่ในตารางที่ 4

ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าตัวกรองขนาด 5μm-0.3μm มีอัตราการคืนตัวของผลิตภัณฑ์สูงสุด (100%) สำหรับอาหาร VLP สำหรับไวรัสตับอักเสบซีที่เก็บเกี่ยวโดยตรง ตัวกรองโพลีโพรพีลีนขนาด 0.6μm มีอัตราการคืนตัวของผลิตภัณฑ์สูงสุด (82%) สำหรับอาหารส่วนกลาง และการกำจัด DNA ของเซลล์โฮสต์อยู่ที่ประมาณ 70%

 

2.2.1.4 อนุภาคคล้ายไวรัสที่ผลิตในระบบแบคทีเรียหรือยีสต์

วิธีการชี้แจงประเภทต่างๆ สำหรับวัคซีน VLP ที่แสดงออกในระบบแบคทีเรียหรือยีสต์นั้นขึ้นอยู่กับการปล่อย VLP ออกสู่ตัวกลางนอกเซลล์ หากไม่สามารถหลั่ง VLP ได้อย่างมีประสิทธิภาพ อาจต้องมีการสลายเซลล์หรือขั้นตอนการสกัดอื่นๆ ก่อนขั้นตอนการชี้แจงจริง แม้ว่านี่จะเป็นมาตรฐานทองคำในอุตสาหกรรมชี้แจงโปรตีน แต่การปั่นเหวี่ยง (แบบต่อเนื่องหรือแบบแบตช์) ที่แสดงออกในระบบที่ใช้แบคทีเรียหรือยีสต์ เมื่อไม่นานนี้ กระบวนการผ่านเมมเบรนได้กลายเป็นทางเลือกที่น่าสนใจมากเนื่องจากปรับขนาดได้ง่ายและเข้ากันได้กับการรักษาแบบใช้ครั้งเดียว

 

Richter และ Topell อธิบายการใช้การปั่นเหวี่ยง TFF หรือการใช้ทั้งสองอย่างร่วมกันในการเตรียม VLP ที่ผลิตใน E. coli ที่ผ่านการทำให้บริสุทธิ์ ในงานของพวกเขา เมมเบรน TFF ขนาด 0.45m ถูกใช้เพื่อเจือจางและทำให้ E. coli ที่ผ่านการทำให้เป็นเนื้อเดียวกันเป็นเนื้อเดียวกันที่อุณหภูมิ 5 องศา พวกเขายังสังเกตว่า TFF ที่ใช้เมมเบรนนั้นเหมาะสำหรับการจัดการการเก็บเกี่ยวที่มีความหนืดสูง โดยควรใช้หน่วย TFF ที่มีการกำหนดค่าช่องเปิด

การแยกสารด้วยแรงเหวี่ยงยังได้รับการประเมินว่าเป็นทางเลือกแทน TFF ในกรณีนี้ โฮโมจีเนตที่ได้จะไม่เจือจางและปั่นที่ 4 องศาเป็นเวลา 105 นาที 10000 กรัม โดยไม่ต้องถ่ายโอนการเคลือบอ่อน ของเหลวส่วนบนถูกเทออกจากอนุภาคและปั่นซ้ำที่ 4 องศาและ 10,000 กรัมเป็นเวลา 60 นาที จากนั้นจึงนำของเหลวส่วนบนออกจากอนุภาคปัจจุบัน เจือจางด้วยบัฟเฟอร์ EB (Tris HCl 43.89 มิลลิโมลาร์, Tris Base 6.11 มิลลิโมลาร์, EDTA 5.0 มิลลิโมลาร์, Triton X-100 10% (v/v) 1:2 และกรองด้วยอุปกรณ์กรองปลอดเชื้อขนาด 0.22 มิลลิโมลาร์ การประมวลผลเพิ่มเติม รายงานยังระบุว่ากระบวนการขยายขนาดสำหรับการผลิตวัคซีน VLP ใน E. coli ในระดับ 800 ลิตร ได้รับการชี้แจงโดยการผสมผสานระหว่างการปั่นเหวี่ยงและ TFF

 

วัคซีนป้องกันโรคตับอักเสบอีชนิดรีคอมบิแนนท์ HEV 239 ได้รับอนุญาตให้ใช้ในจีนเพื่อสร้างภูมิคุ้มกันให้กับผู้ใหญ่ที่มีอายุ 16 ปีขึ้นไป แอนติเจนของวัคซีน (VLP) ถูกแสดงออกในเชื้ออีโคไล และกระบวนการผลิตแอนติเจนได้รับการพิสูจน์แล้วว่าเพิ่มขนาดในระดับ 50L ผลิตภัณฑ์ถูกสกัดโดยการทำให้เชื้ออีโคไลแตก และแยกส่วนอินคลูชันออกจากชิ้นส่วนเซลล์ด้วยการล้างอย่างหนักด้วยบัฟเฟอร์ที่มีไตรตอนเอ็กซ์-100 2% จากนั้นละลายด้วยโฮโมจีไนเซอร์ยูเรีย 4 M TFF ทำให้เชื้อฮิวแมนปาปิลโลมาไวรัส VLP ที่ผลิตในเชื้อ Saccharomyces cerevisiae บริสุทธิ์ (15L) ไลเสทเซลล์ที่ได้รับการบำบัดด้วยนิวคลีเอสจะถูกทำให้บริสุทธิ์ด้วยการกรองแบบไมโครโฟลว์แบบครอสโฟลว์ในโหมดทรานสฟิลเตรชันโดยใช้แผ่นกรองเส้นใยกลวงขนาด 0.65 μm กระบวนการเดียวกันนี้ใช้ในการผลิตวัคซีน แม้ว่าวัคซีนที่ใช้ VLP จะมีเพียงไม่กี่ชนิดเท่านั้นที่เข้าสู่เชิงพาณิชย์ แต่ก็มีวัคซีนที่ใช้ VLP หลายตัวที่อยู่ในระหว่างการพัฒนา โดยส่วนใหญ่จะผ่านกระบวนการทำให้บริสุทธิ์โดยใช้การปั่นเหวี่ยงหรือเทคโนโลยีเมมเบรน

 

เนื่องจากได้รับอิทธิพลจากพื้นที่จำกัด เราจะมาแบ่งปันเนื้อหาครึ่งหลังในบทต่อไป ในบทความต่อไป เราจะมาแบ่งปันกรณีตัวอย่างของการชี้แจงวัคซีนและการใช้ส่วนประกอบของเมมเบรนที่เกี่ยวข้อง

 

Guidling Technology เป็นบริษัทแรกในวงจรการแปลและได้สะสมประสบการณ์ที่เกี่ยวข้องเพียงพอในการชี้แจงวัคซีน Guidling Technology เป็นบริษัทพัฒนาและผลิตที่เน้นด้านชีวเภสัชกรรมและการเพาะเลี้ยงเซลล์ การทำให้บริสุทธิ์และการแยก ผลิตภัณฑ์ต่างๆ ใช้กันอย่างแพร่หลายในชีวการแพทย์ การวินิจฉัย การกรองของเหลวในอุตสาหกรรม การตรวจจับ การทำให้บริสุทธิ์ การทำให้บริสุทธิ์และกระบวนการทำให้เข้มข้น Guidling ประสบความสำเร็จในการพัฒนาหลอดเหวี่ยงแบบอัลตราฟิลเตรชัน ตลับเมมเบรนแบบอัลตราฟิลเตรชัน/ไมโครฟิลเตรชัน ตัวกรองกำจัดไวรัส อุปกรณ์ตัวกรองการไหลแบบสัมผัส เมมเบรนซ้อนลึก ฯลฯ ซึ่งตอบสนองสถานการณ์การใช้งานของชีวเภสัชกรรมและการเพาะเลี้ยงเซลล์ได้อย่างสมบูรณ์

 

เมมเบรนและตัวกรองเมมเบรนของเราใช้กันอย่างแพร่หลายในการทำให้เข้มข้น สกัด และแยกสารกรองเบื้องต้น ไมโครฟิลเตรชัน อัลตราฟิลเตรชัน และนาโนฟิลเตรชัน กลุ่มผลิตภัณฑ์ที่หลากหลายของเรา ตั้งแต่การกรองในห้องปฏิบัติการแบบใช้ครั้งเดียวขนาดเล็กไปจนถึงระบบกรองประเภทการผลิต การทดสอบความปลอดเชื้อ การหมัก การเพาะเลี้ยงเซลล์ และอื่นๆ สามารถตอบสนองความต้องการในการทดสอบและการผลิตได้