กระบวนการทำให้บริสุทธิ์ขั้นปลายของวัคซีนโรคอุจจาระร่วงสุกร

โรคท้องร่วงเป็นหนึ่งในสามโรคสำคัญที่ก่อให้เกิดความสูญเสียทางเศรษฐกิจอย่างมากต่ออุตสาหกรรมสุกรในประเทศจีน มีหลายปัจจัยที่ทำให้เกิดอาการท้องเสียในสุกร และปัจจัยด้านไวรัสนั้นร้ายแรงที่สุด สุกรทุกวัยสามารถติดเชื้อได้ โดยเฉพาะลูกสุกรดูดนม และอัตราการเสียชีวิตหลังการติดเชื้ออาจสูงถึงกว่า 50% ไวรัสโรคอุจจาระร่วงจากโรคระบาดในสุกร (PEDV) และไวรัสโรคกระเพาะและลำไส้อักเสบจากเชื้อสุกร (TGEV) แพร่หลายไปทั่วโลก และไวรัสทั้งสองชนิดนี้สามารถติดเชื้อแบบเดี่ยวๆ หรือรวมกันก็ได้ ปัจจุบันยังไม่มียาเฉพาะสำหรับรักษา PEDV และ TGEV และการป้องกันและควบคุมโรคท้องร่วงในสุกรส่วนใหญ่เป็นวัคซีนเชิงพาณิชย์

วัคซีนทั่วไปสำหรับโรคท้องร่วงจากโรคระบาดในสุกรส่วนใหญ่ประกอบด้วยวัคซีนเชื้อตายทั้งตัวและวัคซีนเชื้อเป็น ในทางคลินิก วัคซีนเชื้อตายหรือวัคซีนเชื้อตายแบบคู่ PEDV และ TGEV และวัคซีนเชื้อตายแบบทริปเปิล PEDV, TGEV และวัคซีนโรตาไวรัส (RV) ของสุกร มักใช้กันทั่วไป โดยส่วนใหญ่เป็นวัคซีนแบบกลุ่ม PEDV และ TGEV

ปัจจุบันมีวัคซีนป้องกันโรคท้องร่วงจากโรคระบาดในสุกรจำนวนมากในประเทศจีน

กระบวนการผลิตวัคซีนเชื้อตายและวัคซีนเชื้อตายจะคล้ายกัน โดยหลักๆ แล้วประกอบด้วยขั้นตอน 5 ขั้นตอนในการเพาะเชื้อก่อโรค การยับยั้งหรือลดฤทธิ์เชื้อ การสกัดและการทำให้บริสุทธิ์เชื้อโรค การเตรียมวัคซีนและบรรจุภัณฑ์ และการควบคุมคุณภาพวัคซีน บทความนี้จะแนะนำขั้นตอนการทำให้เชื้อโรคบริสุทธิ์เป็นหลัก

ชี้แจง

วัตถุประสงค์ของการชี้แจงคือเพื่อให้แน่ใจว่าสามารถกำจัดเศษเซลล์และการรวมตัวของอนุภาคขนาดใหญ่อื่นๆ ได้ ในการผลิตเซลล์เพาะเลี้ยงพิษต่างๆ นอกเหนือจากการประกอบด้วยอนุภาคไวรัสจำนวนมากแล้ว ยังมีเศษเนื้อเยื่อเซลล์และผลิตภัณฑ์จากการเผาผลาญและสิ่งสกปรกอื่น ๆ อีกมากมาย ทำให้พิษอยู่ในสถานะขุ่นมัวหรือกึ่งขุ่นโดยตรง การใช้การดำเนินการความเข้มข้นของพิษนี้จะทำให้เยื่อกรองแบบอัลตราฟิลเตรชันถูกบล็อกในไม่ช้า และไม่สามารถทำให้ความเข้มข้นของพิษสมบูรณ์ได้ และส่งผลให้เกิดเศษเยื่อกรองแบบอัลตราฟิลเตรชัน ดังนั้นก่อนที่พิษจะเข้มข้นจะต้องทำให้กระจ่างก่อน ซึ่งปกติจะทำโดยการปั่นแยกด้วยความเร็วต่ำและการกรองแบบเมมเบรน ควรสังเกตว่าเมื่อใช้เทคโนโลยีการแยกเมมเบรน เนื่องจากวัสดุเมมเบรนมักจะมีอิเล็กโตรเนกาติวีตี้หรือกลุ่มที่ไม่ชอบน้ำ จึงจำเป็นต้องตรวจสอบว่าวัสดุของเมมเบรนมีการดูดซับอนุภาคไวรัสหรือไม่

ขั้นตอนการชี้แจงที่มีประสิทธิภาพต้องอาศัยการผสมผสานระหว่างความสามารถในการกำจัดอนุภาคของแข็งสูงและผลผลิตของผลิตภัณฑ์สูง การขยายสัญญาณที่ง่ายดาย และการป้องกันหน่วยปฏิบัติการขั้นปลายน้ำในภายหลัง ปัจจุบันมีการใช้ตัวกรองแบบลึกเพื่อการดำเนินการชี้แจง

อย่างไรก็ตาม เมื่อขนาดการเพาะปลูกมีขนาดใหญ่เกินไป จะต้องใช้เยื่อกรองแบบลึกจำนวนมาก ส่งผลให้ต้นทุนของวัสดุสิ้นเปลืองเพิ่มขึ้นอย่างมาก ในเวลาเดียวกัน การเพาะเลี้ยงเซลล์ที่มีความหนาแน่นสูงจะช่วยลดภาระของเมมเบรนกรองแบบลึก ส่งผลให้ต้นทุนเพิ่มขึ้นและการเจือจางของผลิตภัณฑ์มากเกินไป

วิธีการกรองแบบไมโครฟิลเตรชันส่วนใหญ่ใช้อุปกรณ์กรองการไหลแบบสัมผัส และส่วนประกอบของเมมเบรนคือคาสเซ็ตเมมเบรนแบบแบนและเส้นใยกลวง การกรองการไหลตามแนวเส้นสัมผัส (TFF) ถูกขับเคลื่อนโดยความแตกต่างของแรงดันของเมมเบรน สารและสิ่งสกปรกที่มีขนาดเล็กกว่าขนาดรูพรุนของเมมเบรนจะทะลุผ่านเมมเบรน ในขณะที่สิ่งสกปรก เช่น เซลล์ที่มีอนุภาคขนาดใหญ่จะถูกดักจับไว้ ขนาดรูพรุนของเมมเบรนที่ใช้สำหรับการกรองระดับไมโครคือ {{0}}.45/0.22μm การกรองไมโครฟิลเตรชันแบบสัมผัสเส้นใยกลวงสามารถประมวลผลของเหลวที่มีปริมาณของแข็งสูงได้โดยตรง เช่น สารเพาะเลี้ยงเซลล์ที่มีความหนาแน่นสูง สามารถขจัดขั้นตอนการปั่นแยกและการกรองล่วงหน้าด้วยขั้นตอนน้อยลงและใช้งานง่าย เมมเบรนสามารถใช้ซ้ำๆ ผ่านการทำความสะอาด ช่วยลดการลงทุนอุปกรณ์และการดำเนินงาน ต้นทุนสอดคล้องกับข้อกำหนดของการผลิตอัตโนมัติแบบโมดูลาร์

ความเข้มข้นและการทำให้บริสุทธิ์

หลังจากการชี้แจงเบื้องต้น อาหารเลี้ยงเชื้อไวรัสยังคงมีสิ่งสกปรกจำนวนมาก รวมถึงอนุภาคที่มีข้อบกพร่อง เปลือกไวรัส ไซโตทอกซิน ตัวกลาง เซรั่ม และชิ้นส่วนเซลล์ ฯลฯ หากฉีดสิ่งเจือปนเหล่านี้เข้าไปในสัตว์ สิ่งเหล่านี้จะไม่เพียงส่งผลต่อประสิทธิภาพของ แต่ยังทำให้เกิดการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันที่แข็งแกร่งของโฮสต์ และยังนำไปสู่การตายของสัตว์ที่ได้รับการฉีดวัคซีนอีกด้วย ดังนั้น ความเข้มข้นและการทำให้บริสุทธิ์จึงมีความจำเป็นเพื่อกำจัดสิ่งเจือปน เช่น เฮเทอโรโปรตีนและชิ้นส่วนของเซลล์ เพิ่มประสิทธิภาพและกระตุ้นการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันที่มีประสิทธิภาพ ลดปริมาณวัคซีนที่ใช้ และลดอาการไม่พึงประสงค์

หลักการของการทำให้ไวรัสบริสุทธิ์: เพื่อรักษากิจกรรมทางชีวภาพและการติดเชื้อของไวรัสเป็นหลักฐาน เพื่อขจัดสิ่งสกปรกของไวรัสและแยกความบริสุทธิ์สูงของไวรัส

ปัจจุบันวิธีการทำให้เข้มข้นและการทำให้บริสุทธิ์หลักที่ใช้ในการผลิตขนาดใหญ่คือการกรองแบบอัลตราฟิลเตรชัน

วิธีการกรองแบบอัลตราฟิลเตรชัน ส่วนใหญ่ใช้อุปกรณ์อัลตราฟิลเตรชันแบบไหลสัมผัส ระบบกรองเส้นใยกลวง และอุปกรณ์กรองอื่นๆ ภายใต้สถานการณ์ปกติ การใช้วิธีกรองแบบอัลตราฟิลเตรชันสามารถทำให้ไวรัสมีความเข้มข้นมากกว่า 100 เท่า อัตราการกำจัดเฮเทอโรโปรตีนสูงถึง 99% เทคโนโลยีการกรองเมมเบรนแบบเส้นใยกลวงมีข้อดีคือแรงเฉือนที่ไม่รุนแรงและต่ำ การเสียบปลั๊กที่ง่ายดาย การทำงานที่ยืดหยุ่น อายุการใช้งานยาวนานและต้นทุนต่ำ และการขยายสัญญาณที่ง่าย ดังนั้นจึงขอแนะนำให้เลือกเส้นใยแบบกลวงสำหรับความเข้มข้นและการทำให้ไวรัสบริสุทธิ์

เมื่อใช้วิธีการกรองแบบอัลตราฟิลเตรชันสำหรับความเข้มข้นและการทำให้บริสุทธิ์ สิ่งสำคัญคือต้องเลือกขนาดรูพรุนของเมมเบรนที่เหมาะสม ซึ่งจะกำหนดประสิทธิภาพและคุณภาพของความเข้มข้นโดยตรง ในอีกด้านหนึ่ง จำเป็นต้องเลือกรูรับแสงของเมมเบรนเพื่อดักจับโมเลกุลเป้าหมายอย่างมีประสิทธิภาพเพื่อให้แน่ใจว่าได้ผลผลิต และในทางกลับกัน ควรพิจารณาผลการกำจัดและความเร็วในการประมวลผลของเฮเทอโรโปรตีนอย่างเต็มที่ ดังนั้นหลักการที่ดีที่สุดคือการเลือกเมมเบรนที่มีขนาดรูพรุนที่ใหญ่ที่สุดที่สามารถดักจับโมเลกุลเป้าหมายได้ และลองเลือกเมมเบรนกรองที่มีการกระจายขนาดรูพรุนสม่ำเสมอ

ไวรัสโรคอุจจาระร่วงจากโรคระบาดในสุกร (PEDV) และไวรัสกระเพาะและลำไส้อักเสบที่ติดต่อได้ (TGEV) ต่างก็เป็นโคโรนาไวรัสซึ่งเป็นทรงกลมหลายรูปแบบ โดยมีหนามแหลมคล้ายหนามกลับหัว มีเส้นผ่านศูนย์กลางตั้งแต่ 60 ถึง 190 นาโนเมตร โรคโรตาไวรัสเป็นโรคติดต่อจากสัตว์สู่คน โดยโรตาไวรัส (RV) มีลักษณะคล้ายวงล้อและมีเส้นผ่านศูนย์กลางประมาณ 70 นาโนเมตร โดยทั่วไปไวรัสทั้งสามชนิดนี้สามารถดักจับได้โดยใช้เมมเบรนกรองแสง 100-750kd Aperture

Guidling Technology เป็นองค์กรเทคโนโลยีขั้นสูงระดับชาติที่มุ่งเน้นด้านเภสัชภัณฑ์ชีวภาพ การเพาะเลี้ยงเซลล์ การทำให้บริสุทธิ์และความเข้มข้นของชีวการแพทย์ การวินิจฉัยโรค และของเหลวทางอุตสาหกรรม เราประสบความสำเร็จในการพัฒนาอุปกรณ์กรองแบบแรงเหวี่ยง ตลับกรองแบบอัลตราฟิลเตรชันและไมโครฟิลเตรชัน ตัวกรองไวรัส ระบบ TFF ตัวกรองเชิงลึก เส้นใยกลวง ฯลฯ ซึ่งตอบสนองสถานการณ์การใช้งานของชีวเภสัชภัณฑ์ การเพาะเลี้ยงเซลล์ และอื่นๆ ได้อย่างสมบูรณ์ เมมเบรนและตัวกรองเมมเบรนของเรามีการใช้กันอย่างแพร่หลายในด้านความเข้มข้น การสกัด และการแยกการกรองเบื้องต้น การกรองระดับไมโคร การกรองแบบอัลตราฟิลเตรชัน และนาโนฟิลเตรชัน กลุ่มผลิตภัณฑ์มากมายของเรา ตั้งแต่การกรองในห้องปฏิบัติการขนาดเล็กแบบใช้ครั้งเดียวไปจนถึงระบบการกรองการผลิต การทดสอบความปลอดเชื้อ การหมัก การเพาะเลี้ยงเซลล์ และอื่นๆ อีกมากมาย ตอบสนองความต้องการของการทดสอบและการผลิต Guidling Technology รอคอยที่จะร่วมมือกับคุณ!