วิธีการบํารุงรักษาและการใช้หลอดกรองพิเศษ

วิธีการบํารุงรักษาและการใช้หลอดกรองพิเศษ

ฟังก์ชั่นของหลอดกรองพิเศษ:

1)ความเข้มข้น; 2)เปล่งน้ําทะเล; 3)แทนที่บัฟเฟอร์; 4)มันมีผลของการทําให้บริสุทธิ์บางส่วนของ

1.ใหม่หลอดกรองพิเศษสามารถนํามาใช้โดยตรงโดยไม่ต้องรักษาอื่นๆ;

2. ท่อกรองพิเศษไม่สามารถฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิสูงได้

3.การรักษาหลอดกรองพิเศษเมื่อเปลี่ยนโปรตีนเข้มข้น

หลอดกรองพิเศษสามารถนํากลับมาใช้ใหม่ได้ แช่ใน 0.1M NaOH เป็นเวลา 1-2 ชั่วโมงล้างด้วยน้ําแล้วล้างด้วยสารละลายที่เกี่ยวข้อง (น้ําที่ผ่านการฆ่าเชื้อหรือ PBS) บนเครื่องหมุนเหวี่ยงเป็นเวลา 3 ครั้งซึ่งสามารถใช้เพื่อเข้มข้นโปรตีนใหม่

4.การรักษาปกติวางหลอดกรองพิเศษ

สําหรับหลอดกรองพิเศษที่ใช้บ่อยให้แช่ใน 0.1M NaOH เป็นเวลา 1-2 ชั่วโมงล้างด้วยน้ําและแช่ในน้ําที่ผ่านการฆ่าเชื้อ ตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้ทําให้เมมเบรนตัวกรองเปียกและป้องกันไม่ให้แบคทีเรียเติบโต

5.การรักษาของหลอดกรองพิเศษที่วางเป็นเวลานาน

หากไม่ได้ใช้หลอดกรองพิเศษเป็นเวลานานให้แช่ใน 0.1M NaOH เป็นเวลา 1-2 ชั่วโมงล้างด้วยน้ําและแช่ในเอทานอล 20% เพื่อจัดเก็บ ตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้ทําให้เมมเบรนตัวกรองเปียกและป้องกันไม่ให้แบคทีเรียเติบโต

6.ความเร็วแรงเหวี่ยงที่ใช้สําหรับหลอดกรองพิเศษ

ความเร็วแรงเหวี่ยงโดยทั่วไปคือ 4000 รอบต่อนาที (โดยทั่วไปแนะนําให้ใช้ 3000 กรัมและสูงสุดไม่เกิน 4000 กรัม) หลังจากการหมุนเหวี่ยงเป็นเวลา 5-8 นาทีตัวอย่าง 4ml สามารถมีความเข้มข้นน้อยกว่า 1 มล. ถึงไมโครลิตรหลายสิบตัว หากความเร็วสูงเกินไปโปรตีนเป้าหมายจะหลุดออกส่งผลให้สูญเสียโปรตีนเป้าหมาย ความเร็วต่ํา, เวลา- ใช้เวลานานและประสิทธิภาพการทํางานต่ํา;

7. ข้อควรระวังเมื่อหัวปืนขยายเข้าไปในท่อกรองพิเศษ

เมื่อเพิ่มสารละลายโปรตีนหรือบัฟเฟอร์ลงในหลอดกรองพิเศษสามารถใช้หัวปืนสีน้ําเงินได้ อย่างไรก็ตามเมื่อโปรตีนเป้าหมายเข้มข้นถูกดูดซึมจากด้านล่างของท่อกรองพิเศษจะต้องใช้หัวปืนสีเหลือง เมื่อใส่หัวปืนเข้าไปในท่อกรองพิเศษจะต้องป้องกันไม่ให้สัมผัสเมมเบรนตัวกรองเพื่อหลีกเลี่ยงการเจาะเมมเบรนตัวกรอง

8. ลดการสูญเสียการดูดซับโปรตีนของหลอดกรองพิเศษ

เยื่อหุ้มของหลอดกรองพิเศษสามารถดูดซับโปรตีนซึ่งจะลดโปรตีนเป้าหมายประมาณ 30%; เพื่อลดการสูญเสียโปรตีนหลังจากดูดซับสารละลายโปรตีนเป้าหมายให้ล้างก้นหลอดกรองพิเศษด้วยบัฟเฟอร์โปรตีนเพื่อล้างโปรตีนส่วนใหญ่ที่ดูดซับโดยเมมเบรนกรองและลดการสูญเสียโปรตีนเป้าหมาย หากโปรตีนบริสุทธิ์มีความเข้มข้นให้ใส่ใจว่าปริมาณเข้มข้นไม่ควรเล็กเกินไป โดยทั่วไปไม่ว่าวิธีการหมุนเหวี่ยงสารละลายโปรตีน L ประมาณ 200 μ L จะถูกเก็บไว้ที่ด้านล่าง

9. วิธีการกําหนดความล้มเหลวของท่อกรองพิเศษ

ภายใต้การใช้งานปกติเมื่อเมมเบรนกรองไม่ถูกเจาะสารละลายโปรตีนเข้มข้นไม่มีโปรตีนหรือปริมาณต่ํามาก (รวมถึงโปรตีนเป้าหมาย) ในขณะที่สารละลายที่กรองครั้งแรกมีโปรตีนเป้าหมายแสดงว่าเมมเบรนตัวกรองไม่ถูกต้องและจําเป็นต้องแทนที่ด้วยหลอดกรองอัลตร้าฟิลเตอร์ใหม่