คำถามที่พบบ่อยเกี่ยวกับอุปกรณ์กรองแรงเหวี่ยง

Q1. จำเป็นต้องแยกโปรตีนที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่างกัน ดังนั้น น้ำหนักโมเลกุลของโปรตีนควรต่างกันมากน้อยเพียงใด

ตอบ: ขนาดของโปรตีนทั้งสองชนิดต้องแตกต่างกัน 10 เท่าขึ้นไป

 

Q2. สามารถหมุนเหวี่ยงอัลอุปกรณ์กรองผ่านการฆ่าเชื้อและทนต่อการล้างด้วยด่าง ?

ตอบ: สามารถฆ่าเชื้อได้ด้วยสารละลายเอทานอล 75 เปอร์เซ็นต์ และเมมเบรนสามารถทนต่อการซักด้วยด่างด้วยโซเดียมไฮดรอกไซด์ 0.1-0.5N

 

Q3. จะรับมืออย่างไรหากโปรตีนตกตะกอนระหว่างความเข้มข้น?

ตอบ: ถ้าโปรตีนเข้มข้นเร็วเกินไปหรือเข้มข้นเกินไป อาจทำให้โปรตีนตกตะกอนได้ และความเข้มข้นสุดท้ายของโปรตีนหลังความเข้มข้นไม่ควรสูงเกินไป โปรตีนที่ไวต่ออัตราความเข้มข้นและมีแนวโน้มที่จะตกตะกอน วิธีการปรับปรุงที่แนะนำ:

ลดความเร็วของแรงเหวี่ยง

ใช้เมมเบรนอัลตราฟิลเตรชันที่มีน้ำหนักโมเลกุลสูงกว่า

เป่าและดูดหลอดเข้มข้น จากนั้นปั่นแยก

 

Q4. อะไรคือสาเหตุที่เป็นไปได้ว่าทำไมอุปกรณ์กรองแบบแรงเหวี่ยงไม่สามารถหมุนเหวี่ยงลงได้?

ตอบ: คุณสามารถใช้สารละลายเอทานอลที่มีน้ำประมาณร้อยละ 20 สำหรับการปั่นแยกเบื้องต้นได้ หากไม่สามารถปั่นแยกหลอดอัลตราฟิลเตรชันได้ เนื่องจากเยื่อกรองอัลตราฟิลเตรชันแห้งสนิท พื้นผิวของเมมเบรนจะไม่ชอบน้ำเล็กน้อย และฟลักซ์สามารถคืนสภาพได้หลังจากการแทรกซึมที่ระดับต่ำ ตัวทำละลายแรงตึงผิว

 

Q5. วิธีการใช้ที่ถูกต้องและการจัดเก็บอุปกรณ์ตัวกรองแบบแรงเหวี่ยง

ตอบ: ควรปั่นแยกอุปกรณ์กรองแบบแรงเหวี่ยงด้วยน้ำบริสุทธิ์ก่อนใช้งานเพื่อตรวจสอบความสมบูรณ์ หลังจากใช้งานแต่ละครั้ง จะต้องเก็บไว้ในที่เปียกชื้นเพื่อป้องกันไม่ให้เมมเบรนแห้ง

 

Q6. อุปกรณ์ตัวกรองแรงเหวี่ยงกำจัดเอนโดท็อกซินได้อย่างไร ?

ตอบ: อุปกรณ์กรองแบบแรงเหวี่ยงที่เราจัดเตรียมไว้ไม่ได้รับการบำบัดด้วยสารเอนโดทอกซิน และเนื่องจากสารเอนโดทอกซินมีอยู่ทั่วไปในธรรมชาติ ตัวอย่างที่ต้องการสารเอนโดทอกซินสามารถทำความสะอาดล่วงหน้าด้วยโซเดียมไฮดรอกไซด์ 0.5N ก่อนการทดลอง จากนั้นล้างด้วย น้ำ RO เพื่อกำจัดเอนโดทอกซินส่วนใหญ่

 

Q7. เมื่อนำโปรตีนเข้มข้นไปวิเคราะห์ปลายน้ำพบว่ามีการรบกวน เกิดจากสาเหตุใด?

ตอบ: สามารถล้างอุปกรณ์ตัวกรองแรงเหวี่ยงล่วงหน้าด้วยสารละลายบัฟเฟอร์หรือน้ำบริสุทธิ์ หากสัญญาณรบกวนยังคงอยู่ ให้ล้างด้วยโซเดียมไฮดรอกไซด์ 0.1N แล้วล้างด้วยน้ำบริสุทธิ์

 

Q8. Iพบว่าไม่มีโปรตีนเป้าหมายในอาหารเข้มข้นหลังความเข้มข้น อะไรคือสาเหตุที่เป็นไปได้?

A: 1) ความเข้มข้นเริ่มต้นของโปรตีนไม่ควรต่ำเกินไป หากความเข้มข้นต่ำเกินไป เมมเบรนอาจไม่สามารถรักษาไว้ได้

2) เลือกขนาดรูพรุนของเมมเบรนที่เหมาะสม ความเข้มข้นของแรงเหวี่ยงของท่อกรองเป็นของการกรองแบบ Dead-end และขนาดรูพรุนของเมมเบรนโดยทั่วไปจะน้อยกว่า 2 เท่าหรือมากกว่าโปรตีนเป้าหมาย

3) เลือกความเร็วแรงเหวี่ยงที่เหมาะสม

4) ไม่ว่าโปรตีนเป้าหมายจะตกตะกอนหรือไม่

 

Q9. การรักษาทู่ของอุปกรณ์กรองแบบแรงเหวี่ยง

A: การปรับสภาพพื้นผิวของอุปกรณ์กรองแบบแรงเหวี่ยงแบบ Passivation สามารถลดการสูญเสียการดูดซับของโปรตีนบนพื้นผิวเมมเบรน ในกรณีส่วนใหญ่ การปรับสภาพคอลัมน์ก่อนการเข้มข้นของสารละลายโปรตีนที่เจือจางสามารถปรับปรุงการฟื้นตัวได้ เนื่องจากสารละลายสามารถเติมส่วนที่สัมผัสได้ ตำแหน่งการดูดซับโปรตีนเปล่าบนเมมเบรนและพื้นผิว วิธีการทู่คือการแช่คอลัมน์ล่วงหน้าด้วยสารละลายทู่ในปริมาณสูงเป็นเวลานานกว่า 1 ชั่วโมง ล้างคอลัมน์ให้สะอาดด้วยน้ำกลั่น จากนั้นปั่นแยกคอลัมน์ด้วยน้ำกลั่นหนึ่งครั้ง เพื่อขจัดสารละลายเคลือบฟิล์มที่อาจตกค้างอยู่บนเมมเบรนออกให้หมด ระวังอย่าให้เมมเบรนแห้งหลังการเคลือบฟิล์ม หากต้องการเก็บไว้ใช้ในอนาคต จำเป็นต้องเติมน้ำกลั่นที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วเพื่อให้เมมเบรนเปียก กรุณาติดต่อ วิศวกรของเราสำหรับโซลูชันการเคลือบผิวทั่วไป

 

Q10. เมมเบรนอัลตราฟิลเตรชั่นกรองโมเลกุลตามลำดับชั้นหรือไม่?

A: Generally speaking, if the dead-end filtration method is used, it is difficult to accurately remove small molecules among several large molecules by ultrafiltration method. This is because the membrane is a porous network structure, and its filtration mechanism is based on retention rather than passage, such as, the cut off rate of molecules larger than 100kd is >95 เปอร์เซ็นต์หากใช้เมมเบรนกรองพิเศษ 100kd อย่างไรก็ตาม โมเลกุลที่เล็กกว่าขนาดรูพรุนของเมมเบรนไม่สามารถผ่านเมมเบรนได้อย่างอิสระ อัตราการกักเก็บโมเลกุลของ 67kd นั้นมากกว่า 70 เปอร์เซ็นต์ และโปรตีน 43kd ก็ถูกตัดออกมากกว่า 40 เปอร์เซ็นต์เช่นกัน ส่วนประกอบต่าง ๆ ในสารละลายผสมผ่านเยื่อหุ้มเซลล์ไม่ง่ายเหมือนสารละลายส่วนประกอบเดียว ในทางปฏิบัติ ถ้าคุณต้องการแยกมาโครโมเลกุลสองตัว น้ำหนักโมเลกุลที่แตกต่างกันระหว่างพวกมันควรเป็นแปดเท่าหรือมากกว่านั้น

 

Q11. จะแยกโมเลกุลขนาดใหญ่และขนาดเล็กอย่างมีประสิทธิภาพด้วยวิธีอัลตราฟิลเตรชันได้อย่างไร

ตอบ: เนื่องจากความต้องการของกระบวนการ สิ่งสกปรกในโมเลกุลขนาดใหญ่จะถูกกำจัดออก หรือโมเลกุลขนาดเล็กจะถูกกำจัดออกจากโมเลกุลขนาดใหญ่ จึงเป็นเรื่องปกติในการผลิต จำเป็นอย่างยิ่งที่จะต้องเลือกขนาดรูพรุนของเมมเบรน วิธีการกรอง และสภาวะการทำงานที่เหมาะสม โดยทั่วไป หากเลือกข้อกำหนด MWCO ของเมมเบรนระหว่างโปรตีนทั้งสอง การแยกที่เหมาะสมที่สุดสามารถทำได้ หากสารละลายโปรตีนค่อนข้างเจือจาง การทำงานภายใต้แรงดันต่ำจะช่วยให้ได้ผลลัพธ์ที่ดีขึ้นด้วย เลือกการกรองการไหลแบบแทนเจนต์และทำการไดอะฟิลเตรชันหลายครั้งเพื่อให้ได้ผลการแยกที่ดีขึ้น